Parametri cinetici della D-b-Idrossibutirrico deidrogenasi nelle particelle submitocondriali di fegato di ratti ipo ed ipertiroidei.

Abstract: Nelle particelle submitocondriali di fegato di ratti ipertiroidei, l'attività specifica della D-?-idrossibutirrato deidrogenasi (BDH) risulta ridotta di quasi il 50%. Trattandosi di un enzima lecitina-dipendente, preliminari indicazioni sembrano escludere che tale riduzione sia imputabile all'alterazione del pattern fosfolipidico mitocondriale causato dall'ipertiroidismo, nei ratti ipotiroidei al contrario, l'attività della BDH epatica non subisce variazioni significative: si passa da una attività specifica di 0,765 nei ratti eutiroidei ad una di 0,714 ?moli NAD+ rid/min/mg proteine in quelli ipotiroidei. Uno studio cinetico dell'enzima associato alle membrane, nelle particelle submitocondriali di fegato, ha evidenziato che nei ratti ipertiroidei i parametri cinetici risultano notevolmente alterati mentre in quelli ipotiroidei non si discostano molta dai valori normali. Trattandosi di una reazione enzimatica 2 substrati co spostamento singolo ordinato, i parametri cinetici sono stati determinati mediante grafici doppio reciproci ed è stata usata la nomenclatura di Cleland. Nei ratti eutiroidei sono stati trovati i seguenti valori: Ka (costante di Michaelis del D-?- idrossibutirrato) = 1,65 m; Kb (costante di Micaelis del NSD+) = 0,18?M; Vmax 0 0,98 ?moli NAD+ rid/min/?g proteine; Ka (costante di dissociazione del D-B- idrossibutirrato) 0 10,84 m; Kb (costante di dissociazione del NAD+) = 1,18 Mm. Nei Ratti ipertiroidei le prime due cotanti (Ka e Kb) diminuiscono rispettivamente del 32 e del 24%. Questi risultati indicano che la BDH epatica nell'ipertiroidismo ha una minore affinità per i propri substrati e inoltre questi in tali condizioni risultano più fortemente legati all'enzima. Anche la concentrazione del D-B-idrossibutirrato e dell'acetoacetato nel fegato e nel sangue dei ratti ipertiroidei, a differenza di quelli ipotiroidei, risulta fortemente alterata. Si può dunque ipotizzare che nell'ipotiroidismo o la BDH sia fortemente influenzata dall'alta concentrazione degli ormoni oppure che risenta delle variazioni ambientali indotte da questo stato patologico per cui le caratteristiche cinetiche vengono modificate.