Effetti dell'estratto di fumo di sigaretta su cellule HFL-1: approccio proteomico

I fibroblasti polmonari, oltre a svolgere una funzione strutturale a livello polmonare, contribuiscono direttamente nei processi di infiammazione nonché al rimodellamento delle vie aeree (1). Il fumo di sigaretta, che è una fonte di stress ossidativi (2), costituisce il rischio maggiore per le malattie polmonari, come la broncopneumopatia cronico ostruttiva (BPCO), l'enfisema, l'asma e il cancro polmonare. L'obiettivo di questo studio, utilizzando un approccio proteomico, è stato quello di valutare le modificazioni co- e post-traduzionali, in una linea cellulare di fibroblasti umani fetali (HFL-1) trattati con estratto di fumo di sigaretta. Le cellule HFL-1 sono state coltivate in vitro in presenza e non di estratto di fumo di sigaretta al 5% e al 10%. Dopo 24 ore, sono state raccolte le cellule non trattate e parte delle trattate; le rimanenti di queste ultime sono state mantenute per altre 24 h in terreno fresco senza fumo (release). Le proteine estratte ai tempi 24 h e 48 h, sono state separate utilizzando l'elettroforesi bidimensionale (2D-SDSPAGE). L'analisi delle mappe, dopo colorazione argentica, ha evidenziato pattern proteici diversi nei differenti punti sperimentali. Abbiamo trovato, che alcuni spot sono ipo/iper espressi dopo stimolazione con il fumo di sigaretta al 5 e al 10%, e che i loro valori rientrano nel range di "non trattati" dopo il rilascio dal fumo. Per altri spot questo trend si mantiene solo dopo stimolazione con fumo al 5%; infatti, con fumo al 10% e successivo rilascio, rimangono alterati. Questi dati preliminari, supportati dall'identificazione di queste proteine tramite spettrometria di massa, potrebbero fare luce sui meccanismi di danno, reversibile e non, causati dal fumo di sigaretta e, quindi, sul ruolo da esso svolto nell'ambito delle patologie polmonari correlate.