Elettroforesi e Cromatografia Liquida ad Alta Prestazione (HPLC) nello Studio Genetico e Biochimico delle Proteine di Riserva di Frumento

Le proteine dei cereali, in particolare le proteine di riserva di frumento gliadine e glutenine, sono da tempo oggetto di numerosi studi genetici e biochimici a causa delle loro strette relazioni con gli aspetti tecnologici e nutrizionali. La cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC) offre ulteriore strumento per lo studio di queste proteine definite da insolite caratteristiche di solubilità, elevata eterogeneità e forte tendenza ad aggregare. In particolare la cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC), separa le proteine sulla base della loro differente idrofobicità superficiale al contrario di quanto avviene nelle separazioni elettroforetiche in cui si sfruttano le differenze di carica (A-PAGE) o di massa (SDS-PAGE). Combinando tra loro queste ultime e la cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC), è possibile ottenere ulteriori informazioni su aspetti genetici e natura dei loci complessi che controllano la sintesi di entrambe queste classi di proteine. Pertanto in questo lavoro si confrontano i risultati ottenuti dall'uso combinato di queste tecniche applicate all'analisi di gliadine e glutenine di aneuploidi di frumenti duri e teneri, di linee di sostituzione intervarietali, e differenti tipi di anfiploidi. Inoltre i dati ottenuti con RP-HPLC dall'analisi di generazioni segreganti e di frumenti duri e teneri privi di particolari gruppi di componenti proteiche (forme nulli), vengono presentati e confermano risultati analoghi ottenuti precedentemente con analisi elettroforetiche mono- e bidimensionali. Per l' RP-HPLC sono state utilizzate in questo lavoro colonne C8 e colonne PLRP-S; queste ultime sono servite a collezionare ciascun picco e analizzarlo mediante A-PAGE e SDS-PAGE