Isolamento di un gene di Solanum commersonii che conferisce tolleranza ad alte concentrazioni saline in Escherichia Coli

Al fine di identificare geni che hanno un ruolo cruciale nell' adattamento/tolleranza allo stress osmotico sono stati recentemente isolati, con un approccio funzionale, dif- ferenti cloni cDNA dalla specie selvatica di patata Solanum commersonii in grado di conferire a cellule di Escherichia coli la capacita? di crescere su un terreno con elevate concentrazioni di NaCI. Uno di questi, il clone N2.1, con un ORF codificante per una proteina di 433 amminoacidi con interessanti domini funzionali, tra cui tre do- mini di membrana e un dominio di legame per l'ATP/GTP, e? stato ulteriormente ca- ratterizzato. Il gene N2.1 e? costitutivamente espresso in vari tessuti di S. commersonii ed e? indotto in risposta ad NaCI in colture cellulari. Un'analisi bioinformatica ha permesso d'iden- tificare nel database genomico di Arabidopsis thaliana, una sequenza genica che codi- fica per una proteina a funzione non nota con il 72% d'identita? aminoacidica con quello di patata. Analisi con RT-PCR, su piantine di 15 giorni di Arabidopsis thaliana hanno evidenziato che questo gene e? trascritto ad elevati livelli in risposta a sale (160 mM NaCl) e che la sua espressione e? indotta da altri ioni presenti nel mezzo di cre- scita, tra cui K+ (125 mM KCl), Li+ (25 mM LiCl), and Cs+ (18 mM CsCI). Piante transgeniche di Arabidopsis con costrutti contenenti il gene N2.1 in direzione senso ed antisenso sono state recentemente ottenute. La caratterizzazione fenotipica e molecolare, attualmente in corso, delle linee trasfor- mate e di due mutanti da inserzione (linee 'T-DNA tagged') provenienti dalla colle- zione del Salk Institute (USA), permettera? di definire il ruolo del gene N2.1 nei mec- canismi molecolari di risposta cellulare a stress salino e osmotico.